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人結(jié)腸癌細(xì)胞株復(fù)蘇時(shí)間快

原載自:www.diyiqukuai.com.cn[行情動(dòng)態(tài)]  2017-01-06  瀏覽次數(shù):1431

   人結(jié)腸癌細(xì)胞株是一種成團(tuán)、貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,如果狀態(tài)好的情況下,生長(zhǎng)非常快,細(xì)胞形態(tài)是不太規(guī)則的三角形.在低濃度時(shí),此細(xì)胞長(zhǎng)梭型(不好描述),高濃度時(shí)長(zhǎng)成一張地毯,后者才是狀態(tài)的。
  人結(jié)腸癌細(xì)胞株的細(xì)胞凍存的步驟:
  (1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。
  (2)去上清液,加入含20%小牛血清的*培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇。
  (3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))
  (4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐。
  (5)人結(jié)腸癌細(xì)胞株的細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
  人結(jié)腸癌細(xì)胞株貨期穩(wěn)定,復(fù)蘇時(shí)間快,若因客觀問題出現(xiàn)污染死亡等情況,我們將為您免費(fèi)提供一次細(xì)胞服務(wù),人結(jié)腸癌細(xì)胞株免費(fèi)提供的細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞染色、(MTT)比色法、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞污染、常規(guī)生物材料細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)等等細(xì)胞實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)。

 

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